Spolni dimorfizam u proteinskom sastavu otrova poskoka (Vipera ammodytes ammodytes)

diplomski rad

• Naslov (engleski): Sexual Dimorphism in the Protein Composition of Nose-horned Viper (Vipera ammodytes ammodytes) Venom
• Autor: Josip Miljković
• Mentor: Ana Shek Vugrovečki (mentor)
• Mentor: Mirela Pavić (mentor)
• Član povjerenstva: Ivona Žura Žaja (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ana Shek Vugrovečki (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Mirela Pavić (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Veterinarski fakultet; (Zavod za fiziologiju i radiobiologiju); Zagreb
• Datum i država obrane: 2020-11-10, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Veterinarska medicina; Temeljne i pretkliničke veterinarske znanosti

Sažetak

Zmijski otrovi su po sastavu složene izlučevine specijaliziranih žlijezda koji sadrže mnoge biološki aktivne tvari koje pripadaju skupini enzima ili toksina. Poskok (Vipera ammodytes ammodytes) je najotrovnije zmija Europe i ujedno otrovnica s najviše zabilježenih ugriza ljudi u Europi. Stanište poskoka rasprostire se gotovo po cijelom Balkanskom poluotoku uglavnom do 2000 m nadmorske visine. Iako se proteinski sastav zmija istražuje već duže vrijeme, zmije otrovnice Europe relativno su slabo istražene. Spolne razlike u proteinskom sastavu otrova zmija slabo su istražene te još nije sigurno postoje li zapravo ili su posljedica individualnih razlika u sastavu otrova. Spolne razlike u proteinskom sastavu otrova poskoka (Vipera ammodytes ammodytes) do sada nisu dokazane niti istražene. Cilj ovog rada je istražiti i analizirati eventualnu prisutnost spolnog dimorfizma u proteinskom sastavu otrova poskoka (Vipera ammodytes ammodytes). Istraživanje je provedeno na otrovima jedanaest mužjaka i devet ženki poskoka (Vipera ammodytes ammodytes). Otrovima je najprije izmjerena koncentracija proteina, a zatim se proteinski sastav analizirao putem SDS-PAGE elektroforeze te su se proteinske pruge denzitometrijski analizirale. Razlike između spolova u koncentraciji proteina u nativnim, nerazrijeđenim uzorcima nisu bile statistički značajne, kao niti ukupni broj dobivenih proteinskih pruga. Značajna spolna razlika (mužjaci > ženke) uočena je u izraženosti proteinske pruge od ~35 kDa u uzorcima pripremljenima bez β-merkaptoetanola. Broj i izraženost pojedinih proteinskih pruga dobivenih SDS-PAGE elektroforezom razlikuju se s obzirom na pripremu samog uzorka, odnosno dodavanjem reducirajućeg sredstva. Dodavanjem β-merkaptoetanola kao reducirajućeg sredstva dovelo je do smanjenja broja proteinskih pruga u odnosu na uzorke u kojima nije dodan β-merkaptoetanola. Zbog uočenih individualnih razlika u broju i izraženosti proteinskih pruga, potrebno je u daljnjim istraživanjima uključiti veći broj životinja te uzeti u obzir i druge čimbenike koji bi mogli utjecati na proteinski sastav otrova.

Sažetak (engleski)

Snake venoms are complex secretions of specialized glands that contain many biologically active substances belonging to the group of enzymes or toxins. The Nose-horned viper (Vipera ammodytes ammodytes) is the most venomous snake in Europe and also with the most recorded human bites in Europe. Its habitat spreads almost all over the Balkan Peninsula, up to 2000 m above sea level. Although the protein composition of snake venom has been studied for a long time, the venomous snakes of Europe have been relatively poorly researched. Reports of gender differences in the venom protein composition are still lacking and it is not yet certain whether they exist or are due to intraspecies individual differences. Gender differences in the venom protein composition of Nose-horned viper (Vipera ammodytes ammodytes) have not been proven or investigated so far. The aim of this study was to investigate and analyze the possible presence of sexual dimorphism in the venom protein composition of Nose-horned viper (Vipera ammodytes ammodytes). The study was conducted on the venoms of eleven male and nine female Nose-horned vipers (Vipera ammodytes ammodytes). The protein concentration of the venoms was first measured, and then the protein composition was analyzed by SDS-PAGE electrophoresis and the protein bands were densitometrically analyzed. Gender differences in protein concentration in native, undiluted samples were not statistically significant, nor were obtained total number of protein bands. Significant gender difference (male > female) was observed in the expression of the ~35 kDa protein band in samples prepared without β-mercaptoethanol. The number and expression of individual protein bands obtained by SDS-PAGE electrophoresis differ regarding the preparation of the sample itself, i.e. the addition of a reducing agent. The addition of β-mercaptoethanol as a reducing agent led to a reduction in the number of protein bands compared to samples in which no β-mercaptoethanol was added. Due to the observed individual differences in protein band number and expression, it is necessary to include a larger number of animals in further research and to consider other factors that could affect the protein composition of venoms.

• Ključne riječi: poskok (Vipera ammodytes ammodytes); otrov; proteinski sastav; SDS-PAGE elektroforeza
• Ključne riječi (engleski): Nose-horned viper (Vipera ammodytes ammodytes); venom; protein composition; SDS-PAGE electrophoresis
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:178:539546
• Studijski program: Naziv: Veterinarska medicina; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica veterinarske medicine (dr. med. vet.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2020-11-20 07:23:12