ANALIZA IZRAŽAJA GENA TIJEKOM IN VITRO DIFERENCIJACIJE NEURONA

diplomski rad

• Naslov (engleski): Analysis of genes expression during in vitro differentiation of neurons
• Autor: Ante Stojanac
• Mentor: Snježana Kužir (mentor)
• Mentor: Ivan Alić (mentor)
• Član povjerenstva: Tajana Trbojević Vukičević (predsjednik povjerenstva)
• Član povjerenstva: Ivan Alić (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Snježana Kužir (član povjerenstva)
• Član povjerenstva: Maja Maurić Maljković (član povjerenstva)
• Ustanova koja je dodijelila akademski / stručni stupanj: Sveučilište u Zagrebu; Veterinarski fakultet; Zagreb
• Datum i država obrane: 2022-02-01, Hrvatska
• Znanstveno / umjetničko područje, polje i grana: BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO; Veterinarska medicina; Temeljne i pretkliničke veterinarske znanosti

Sažetak

Analiza izražaja gena napravljena je tijekom in vitro diferencijacije živčanih matičnih
stanica 0., 1., 3., 5. i 7. dana diferencijacije. U ovom istraživanju napravljena je analiza izražaja
gena karakterističnih za živčane matične stanice (Nestin), neurone (MAP2), astrocite (GFAP)
te za dva sinaptička biljega (Neuroligin1 i Synapsin1) pomoću RT-PCR-a. Rezultati RT-PCRa uspoređeni su sa rezultatima imunocitokemije. Razina izražaja Nestina najveća je tijekom
nultog dana diferencijacije i nakon toga smanjuje se tijekom diferencijacije stanica. Međutim,
dio stanica ostaje u nediferenciranom obliku, i čini 2,5% početne razine Nestina. Stanice, MAP2
izražavaju već nultog dana diferencijacije na razini 16,6% od maksimalnog izražaja koji se
javlja sedmog dana diferencijacije. Izražaj GFAP-a javlja se trećeg dana diferencijacije i
postupno raste do sedmog dana. Imnocitokemijski GFAP pozitivne stanice vidljive su tek petog
dana u 1% prebrojanih stanica. Oba sinaptička biljega pozitivna su već nultog dana
diferencijacije i razina njihovog izražaja postupno se povećava za 70% od početne vrijednosti,
pri čemu je razina Neuroligina1 jača u odnosu na Synapsin1.

Sažetak (engleski)

Analysis of genes expression during in vitro differentiation of neural stem cells 0, 1, 3,
5 and 7 days of differentiation were made. In this study expression of genes typical for neural
stem cells (Nestin), neurons (MAP2), astrocytes (GFAP) and two synaptic markers
(Neuroligin1 and Synapsin1) were analysed using RT-PCR. Results of RT-PCR were compared
with the results of immunocytochemistry. The highest Nestin expression was detected on the
day zero and expression decreased with cell differentiation. Some cells remained
undifferentiated and accounted 2.5% of the initial Nestin expression. MAP2 expression on the
day zero of differentiation was 16.6% of the maximum expression occurring on the seventh day
of differentiation. GFAP expression was observed on the third day of differentiation and
gradually increased. On the fifth day of differentiation immunocytochemical analysis showed
that 1% of the counted cells were GFAP positive. Both synaptic markers were positive already
at day zero of differentiation and their expression gradually increased to 70% of the initial value;
Neuroligin1 expression was stronger than Synapsin1 expression.

• Ključne riječi: živčane matične stanice; neuroni; RT-PCR; izražaj gena
• Ključne riječi (engleski): neural stem cells; neurons; RT-PCR; gene expression
• Jezik: hrvatski
• URN:NBN: urn:nbn:hr:178:052099
• Studijski program: Naziv: Veterinarska medicina; Vrsta studija: sveučilišni; Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski; Akademski / stručni naziv: doktor/doktorica veterinarske medicine (dr. med. vet.)
• Vrsta resursa: Tekst
• Način izrade datoteke: Izvorno digitalna
• Prava pristupa: Otvoreni pristup
• Datum i vrijeme pohrane: 2022-03-02 08:52:33